色譜是一種分離分析手段，分離是核心，因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對(duì)色譜柱的要求是柱效高、選擇性好，分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、氧化鋁、有機(jī)聚合物微球、多孔碳等，其粒度一般為3、5、7、10μm等，柱效理論值可達(dá)5~16萬(wàn)/米。對(duì)于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效；對(duì)于同系物分析，只要500即可；對(duì)于較難分離物質(zhì)對(duì)則可采用高達(dá)2萬(wàn)的柱子，因此一般10~30cm左右的柱長(zhǎng)就能滿足復(fù)雜混合物分析的需要。
分離原理：
采用反相流動(dòng)相體系，而按照正相順序出峰。通過(guò)親水性相互作用，可有效的分離反相色譜柱中因保留能力弱而難分離的強(qiáng)極性化合物。是一種分離機(jī)理，而具備這種分離機(jī)理的鍵合相種類(lèi)非常多。在HILIC中，固定相是極性的，流動(dòng)相中的水相部分表現(xiàn)為強(qiáng)洗脫溶劑，這與傳統(tǒng)的反相色譜法*相反。
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類(lèi)，尺寸規(guī)格也不同： 1、常規(guī)分析柱（常量柱），內(nèi)徑2~5mm（常用4.6mm，國(guó)內(nèi)有4mm和5mm），柱長(zhǎng)10~30cm；
2、窄徑柱（narrow bore，又稱(chēng)細(xì)管徑柱、半微柱semi-microcolumn），內(nèi)徑1~2mm，柱長(zhǎng)10~20cm；
3、毛細(xì)管柱（又稱(chēng)微柱microcolumn），內(nèi)徑0.2~0.5mm；
4、半制備柱，內(nèi)徑>5mm；
5、實(shí)驗(yàn)室制備柱，內(nèi)徑20~40mm，柱長(zhǎng)10~30cm；
6、生產(chǎn)制備柱內(nèi)徑可達(dá)幾十厘米。柱內(nèi)徑一般是根據(jù)柱長(zhǎng)、填料粒徑和折合流速來(lái)確定，目的是為了避免管壁效應(yīng)。
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