技術(shù)文章
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色譜柱是色譜分析中的重要組成部分,起著分離和提純目標(biāo)分子的關(guān)鍵作用。HALO色譜柱作為一種創(chuàng)新的色譜柱品牌,具有許多特殊的優(yōu)勢(shì)和應(yīng)用價(jià)值。首先,HALO色譜柱采用了高效的表面修飾技術(shù),具有優(yōu)異的分離性能。這種技術(shù)能夠在色譜柱表面形成均勻的涂層,提高柱內(nèi)傳質(zhì)速率和樣品分離效率,從而...
2024-11-17C4色譜柱是一款適合于蛋白質(zhì)分離分析用的產(chǎn)品。它使用3微米粒徑的硅膠填料,優(yōu)化了孔徑,固定相配體的烷基鏈長(zhǎng)及表面鍵合密度,可實(shí)現(xiàn)高分辨率和高回收率的分析。使用短柱可以在高流速下實(shí)現(xiàn)快速分析。C4色譜柱在使用前,先進(jìn)行柱的性能測(cè)試,并將結(jié)果保存起來(lái),作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測(cè)試時(shí)要按照C4色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行,只有這樣,測(cè)得的結(jié)果才有可比性。但要注意柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同。1、樣品的前處理:①先使用流動(dòng)相溶解樣品;②...
HALO聚糖色譜柱是一種基于Fused-Core®技術(shù)的快速、高效型液相色譜柱。HALOGlycan是一種高極性固定相,通過(guò)創(chuàng)新的專有化學(xué)鍵合技術(shù),將五羥基配體鍵合到硅膠的多孔殼層。這種高性能材料的色譜柱可用于親水作用色譜(HILIC),以常規(guī)反相溶劑為流動(dòng)相,分離低聚糖,尤其是蛋白質(zhì)連接的聚糖。鍵合相:專有的親水配體,HALOGlycan色譜柱USP分類:L95粒徑大?。?.7μm孔徑大?。?0A聚糖色譜柱優(yōu)勢(shì)及最佳應(yīng)用:①提高酸性和兩性離子的保留;②對(duì)鹽濃度不敏感...
反相色譜柱是以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料,因此有較高的碳含量和更好的疏水性,對(duì)各種類型的生物大分子有更強(qiáng)的適應(yīng)能力,適用范圍較廣,是高效液相色譜儀分析中首要選擇的色譜柱類型。目前,反相色譜柱適用范圍廣,從極性化合物到非極性化合物都可獲得良好的分離,在碳水化合物如低聚糖、苷類糖化學(xué),生藥學(xué)和天然產(chǎn)物化學(xué),生物物質(zhì)如多肽、蛋白、核酸等多個(gè)領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。反相色譜柱的結(jié)構(gòu)及主要功能:本產(chǎn)品是由柱管、接頭、封頭、密封環(huán)、壓帽、篩板、柱填料等組成。1、柱管:多用不銹鋼制成,壓力不高于...
色譜柱由柱管、壓帽、卡套、篩板、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70kg/cm2時(shí),也可采用厚壁玻璃或石英管,管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應(yīng),不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過(guò)拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度,其效果與拋光相同。還有使用熔融硅或玻璃襯里的,用于細(xì)管柱。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板,是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金,孔徑0.2~20μm(5~10&μm),取決于填料粒度,目的是防止填料漏出。色譜柱的作用機(jī)理:可以被認(rèn)為是反相液相色譜...
Dewetting孔去濕現(xiàn)象在方法開發(fā)時(shí)需要考慮的一個(gè)重要因素就是固定相的“孔去濕”。當(dāng)固定相為高疏水(如C18),且流動(dòng)相從一個(gè)高有機(jī)相組分(40%乙腈或甲醇)變到另一個(gè)純水相或高水相組分的時(shí)候,就容易發(fā)生。這也是早期反相色譜柱常常遇到的問(wèn)題。色譜柱在高壓條件下,流動(dòng)相中的水會(huì)被“壓入”起保留作用的固定相孔結(jié)構(gòu)里;當(dāng)泵停止后,水則不會(huì)再進(jìn)入固定相孔內(nèi)。同時(shí),由于固定相是疏水的,滯留于色譜柱中的水被從固定相孔結(jié)構(gòu)中排出。在重啟色譜泵后,即使是高壓也無(wú)法使流動(dòng)相中的水重新回到固...
C18色譜柱根據(jù)極性分為正相柱和反相柱。正相柱大多以硅膠為柱,或是在硅膠表面鍵合-CN、-NH3等官能團(tuán)的鍵合相硅膠柱;反相柱填料主要以硅膠為基質(zhì),在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團(tuán)(ODS)稱為C18柱,其它常用的反相柱還C8、C4、C2和苯基柱等。C18色譜柱的構(gòu)造:由柱管、壓帽、卡套、篩板、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,也可采用厚壁玻璃或石英管,管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應(yīng),不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過(guò)拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的...
為了最大限度地延長(zhǎng)高效液相色譜柱的使用壽命并確保其最佳性能,有必要對(duì)色譜柱進(jìn)行適當(dāng)?shù)木S護(hù)。許多不同因素可能導(dǎo)致色譜柱分離度和靈敏度降低,但通常情況下,下列因素會(huì)導(dǎo)致絕大多數(shù)色譜柱出現(xiàn)性能問(wèn)題。1、污染物通常,樣品中含有來(lái)源于樣品基質(zhì)的成分,這些成分可能會(huì)吸附于色譜柱之上。鹽、脂類、增塑劑和聚合物是在分析過(guò)程中可能與固定相接觸的成分。這些成分會(huì)損壞色譜柱和檢測(cè)器,并在分析過(guò)程中出現(xiàn)雜質(zhì)峰。如果這些雜質(zhì)成分不能被流動(dòng)相洗脫,它們就會(huì)吸附在色譜柱上。隨著時(shí)間的推移,分析物會(huì)與這些雜...
HALO色譜柱是指利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對(duì)混合物進(jìn)行先分離,而后分析鑒定的儀器。液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)?,F(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測(cè)器、信號(hào)記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較,具有高效、快速、靈敏等特點(diǎn)。HALO色譜柱對(duì)高沸點(diǎn)、難氣化合物的混合物通過(guò)色譜柱核淋洗劑并以實(shí)現(xiàn)分離。應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境化學(xué)、石油化工等部門。在選擇HALO色譜柱...
AMT公司為您富有挑戰(zhàn)的分離量身定做了多種孔徑,那么如何選擇正確的孔徑呢??根據(jù)您的分子大小和樣品中分析物的分子量范圍(MWs)來(lái)匹配填料孔徑(表A)。?小分子(®90?分析。-較小孔徑的填料具有更大的比表面積,可提高小分子分析物的保留和載量。-當(dāng)分析物與柱填料孔徑的比例大于0.1時(shí),其在填料上的擴(kuò)散就會(huì)嚴(yán)重受阻,從而導(dǎo)致峰展寬和保留變差。?對(duì)于大環(huán)抗生素和多肽蛋白生物分子,應(yīng)使用較大的孔徑,如HALO®160?Peptide和HALO®400?Pro...
在分離度方程式中有三個(gè)變量:柱效(N)、選擇性(α)及保留因子(K)。我們可以看出,選擇性(α)是調(diào)整和提高分離度有效的參數(shù)。同時(shí),色譜柱固定相是調(diào)整HPLC選擇性(見表B)中四個(gè)有效的參數(shù)之一。當(dāng)然,對(duì)于離子化分析物,流動(dòng)相pH是有效的調(diào)節(jié)參數(shù)。此外,與色譜柱固定相同樣重要的還有流動(dòng)相中有機(jī)溶劑(乙腈vs甲醇)的選擇、及有機(jī)溶劑含量/梯度斜率等等。在開發(fā)一個(gè)色譜分析方法時(shí),可以有多種方式來(lái)實(shí)現(xiàn)特定的分離和保留需求。一種是采取系統(tǒng)篩選多個(gè)固定相的方式,針對(duì)不同的分析,HALO...
柱外體積(ECV)是指色譜系統(tǒng)從進(jìn)樣器到檢測(cè)器這段管路除去色譜柱的總體積。大部分新的高效液相色譜系統(tǒng)都經(jīng)過(guò)了優(yōu)化,因此,可以使用高效的核殼顆粒(SPP)色譜柱,例如HALO?,F(xiàn)在讓我們簡(jiǎn)單概述一下高效液相色譜系統(tǒng)。一個(gè)典型的HPLC系統(tǒng)由脫氣機(jī)、泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱和檢測(cè)器。我們可以仔細(xì)看一下里面。柱外體積通常來(lái)自進(jìn)樣器,包括進(jìn)樣器本身、連接進(jìn)樣器與色譜柱的管路以及連接色譜柱與檢測(cè)器的管路、檢測(cè)器流通池、熱交換器以及各個(gè)連接配件所產(chǎn)生的任何體積。但是有很多舊的色譜儀仍在使用...